技术文章您现在的位置:首页 > 技术文章 > RNA探针(antlsense probe)
RNA探针(antlsense probe)
更新时间:2015-07-24   点击次数:1393次


    通过改变外源cDNA在质粒中的插入方向或选用不同的RNA聚合酶,可以控制RNA的转录方向(即以cDNA的哪条链为模板转录RNA),从而可以得到与mRNA同序列的同义RNA探针(senseprobe)或与mRNA互补的反义RNA探针(antlsense probe),后者即互补RNA(cRNA)探针。通常用同义RNA探针作cRNA探针的阴性对照。ELISA试剂盒
 
    由于在体外转录反应物中可提供有标记物标记的核苷酸为原料.因此经过体外转录就能得到标记的cRNA探针。ceRNA探针是单链探针,故以cRNA探针进行杂交反应可避免应用双链cDNA探针作杂交反应时存在的两条链之间的复性问题。cRNA和mRNA之间形成的杂交体要比cDNA-mRNA杂交体稳定.因此杂交反应后可经受高严格度洗涤。cRNA -mRNA杂交体不受RNA酶的影响,故杂交后还可用RNA酶处理,以除去未结合的探针。此外,体外转录合成的cRNA探针的长度比较一致。ELISA试剂盒

    由于cRNA探针具有以上优点,因此在分子杂交中,特别是在原位杂交中的应用较广泛。但cRNA探针的制备过程较复杂,需要较高的分子生物学实验条件,cRNA对RNA酶敏感,易被RNA酶破坏,因而在操作过程中需严格防止RNA酶污染。ELISA试剂盒

 

化工仪器网

推荐收藏该企业网站
Baidu
map