新闻中心您现在的位置:首页 > 新闻中心 > 酶联免疫试剂盒在实验过程中遇到的各种疑问!
酶联免疫试剂盒在实验过程中遇到的各种疑问!
更新时间:2017-03-31   点击次数:846次

大家在做ELISA试剂盒进口大鼠实验的时候,难免会遇到不同的问题,比如标准曲线不好,试剂盒的回收率,假阴性,假阳性,实验的重复性不好等等。现在我们就来一一解答用户朋友们在实验过程中遇到的各种疑问!
曲线问题: 
 
1.OD值不正常:试剂盒未回温,试剂盒回温到25℃
                            温度控制不好,控制正确温度
                           孵育时间不准确,控制孵育时间
                          洗涤时冲击力太大、浸泡时间过长、洗涤次数增 加,洗涤4-5次,每孔250ul,然后拍干
                        阳光直射,对着风直接吹,避风避光
                        酶标仪的波长错误,酶标仪的波长450nm
                       抗体的稀释错误,正确的稀释抗体
                        水质问题,用娃哈哈矿泉水代替
 
2.白   板:洗涤液配制错误,正确的配制洗涤液
             少加液体(错加液体),正确的步骤加液体
           
 
3.无 梯 度:标准品也污染,换标准品点板
                     OD值不正常,控制温度时间在做一次
                    人为点板,不要点板/
4.线 性 不 好:OD值不正常,控制温度时间在做一次
                         
ELISA试剂盒进口大鼠回收率:
1.空白管阳性高:样本本身就是阳性样本,换阴性样本做回收率
                             空白管在实验中被污染,实验中防止交叉污染
                           水质原因用,娃哈哈矿泉水代替
 
2.偏  高:添加量不准确,的添加量
          添加浓度不适合,添加合适的浓度
           取液吹干量多,准确的取液吹干
           取到其它相层液体,取需用相吹干
           复溶液未稀释或加入量少,正确的稀释复溶液
 
3.偏  低:添加量不准确,的添加量
          添加浓度不适合,添加合适的浓度
          取液吹干量少,准确的取液吹干
           复溶液稀释错误或加入量多,正确的稀释复溶液
假阴、阳性:

1,水质原因:点复溶液验证,用娃哈哈矿泉水代替
2,实验操作原因: 吸取到其它相吹干,准确的取液吹干
                  离心不*,延长离心时间
                  样本的污染,更换样本
                  乳化未处理*,温浴(70℃)处理乳化现象
3,仪器试剂原因:离心管未清洗干净,正确的洗涤器具
                  有机溶剂的影响,做试剂空白看影响结果
4,衍生化试剂原因(长时间衍生化试剂变质),更换衍生化试剂
5,与曲线好坏相关,,ELISA试剂盒进口大鼠保证曲线的正常
 

 

化工仪器网

推荐收藏该企业网站
Baidu
map